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磁珠法核酸提取的步驟及原理是什么?

時間:2022-06-16 17:11:27 來源:洛陽慧慶生物科技有限公司
  磁珠法核酸提取是目前正在普遍地使用的DNA提取方法,利用磁珠法核酸提取,能夠在保證檢驗準(zhǔn)確性的情況下,實現(xiàn)核酸提取的自動化以及批量化,這是其他DNA提取方法無法相比的。那么磁珠法核酸提取的步驟和原理是什么樣的?針對這個問題,接下來慧慶小編就為大家?guī)硐嚓P(guān)介紹。
  

  一、磁珠法核酸提取的步驟

  
  磁珠法核酸提取的步驟通常分為四步,先是裂解,接著結(jié)合,然后洗滌、洗脫,成功提取核酸。
  

  1、裂解

  
  核酸是從細胞或者是其他的生物物質(zhì)中釋放出來的,因此提取核酸需要先進行裂解,裂解步驟可以通過化學(xué)作用、機械作用以及酶作用等方法來實現(xiàn)。酶作用主要就是在樣本中加入溶菌酶或蛋白酶使得細胞破裂,釋放出核酸。蛋白酶還可以降解與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì),促進核酸的分離。
  

  2、結(jié)合

  
  經(jīng)過裂解后的樣本離心處理后取上清,接著加入振蕩混合均勻的磁珠結(jié)合液,將兩者混合均勻,置于磁力架上進行磁分離,棄廢液(吸凈管蓋及管底殘液)。
  

   3、洗滌

  
  核酸的高電荷磷酸骨架使其更具有親水性,根據(jù)其與其他大分子物質(zhì)理化性質(zhì)的差異,可以用選擇性沉淀、層析、密度梯度離心等方法可將核酸分離、純化。
  
  通常會采用無水乙醇沉淀DNA,乙醇的優(yōu)點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學(xué)反應(yīng),對DNA很安全,是理想的沉淀劑。
  

   4、洗脫

  
  經(jīng)過洗滌后的樣本,加水或者EB破壞高鹽環(huán)境,形成低鹽環(huán)境,使DNA從磁珠上脫落。
  磁珠法核酸提取

  二、磁珠法核酸提取的原理

  
  磁珠法核酸提取的原理是,通過裂解液裂解樣本中的細胞組織,利用磁珠的吸附性能,將游離出來的核酸分子吸附到磁珠表面,在這個過程中蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不會被吸附,而是留在了溶液中。將吸附著核酸的磁珠轉(zhuǎn)移到不同的試劑槽內(nèi),通過反復(fù)快速攪拌、混勻液體,經(jīng)過細胞裂解、核酸吸附、洗滌與洗脫等步驟,得到純凈的核酸。
  
  關(guān)于磁珠法核酸提取的步驟及原理,以上就是慧慶小編帶來的相關(guān)介紹。隨著磁珠法核酸提取技術(shù)的不斷發(fā)展進步,DNA提取才真正開始實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化、快速化和自動化。洛陽慧慶生物科技有限公司研發(fā)生產(chǎn)有多種生物磁珠,如果你有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢我們。
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